A microscopia di fluorescenza hà rivoluzionatu a nostra capacità di visualizà è studià esemplari biologichi, chì ci permette di sfondà in u mondu intricatu di e cellule è e molécule. Un cumpunente chjave di a microscopia di fluorescenza hè a fonte di luce utilizata per eccitare e molécule fluorescenti in a mostra. Duranti l'anni, diverse fonti di luce sò state impiegate, ognunu cù e so caratteristiche è vantaghji unichi.
1. Lampada di Mercury
A lampada di mercuriu d'alta pressione, chì varieghja da 50 à 200 watts, hè custruita cù vetru di quartz è hè in forma sferica. Contene una certa quantità di mercuriu in l'internu. Quandu opera, una scarica si trova trà dui elettrodi, facendu u mercuriu per evaporà, è a pressione interna in a sfera aumenta rapidamente. Stu prucessu dura generalmente da 5 à 15 minuti.
L'emissione di a lampa di mercuriu d'alta pressione risulta da a disintegrazione è a riduzzione di e molécule di mercuriu durante a scarica di l'elettrodu, chì porta à l'emissione di fotoni di luce.
Emette una forte luce ultravioletta è blu-violetta, facendu adattata per eccitanti diversi materiali fluorescenti, per quessa hè largamente utilizatu in a microscopia di fluoriscenza.
2. Lampi Xenon
Un'altra fonte di luce bianca comunmente usata in a microscopia di fluorescenza hè a lampada di xenon. Lampade Xenon, cum'è lampade di mercuriu, furnisce un largu spettru di lunghezze d'onda da l'ultraviolet à l'infrarossu vicinu. Tuttavia, sò diffirenti in i so spettri di eccitazione.
I lampi di mercuriu cuncentranu a so emissione in e regioni quasi ultraviolette, blu è verdi, chì assicura a generazione di signali fluorescenti brillanti, ma vene cun forte fototossicità. In cunseguenza, i lampi HBO sò tipicamente riservati per campioni fissi o imaging di fluorescenza debule. In cuntrastu, e fonti di lampade xenon anu un prufilu di eccitazione più liscia, chì permette paraguni di intensità à diverse lunghezze d'onda. Questa caratteristica hè vantaggiosa per applicazioni cum'è e misurazioni di cuncentrazione di ioni di calcium. I lampade Xenon mostranu ancu una forte eccitazione in a gamma vicinu à l'infrared, in particulare intornu à 800-1000 nm.
I lampade XBO anu i seguenti vantaghji nantu à i lampi HBO:
① Intensità spettrale più uniforme
② Intensità spettrale più forte in e regioni infrared è mid-infrared
③ Produzione di energia più grande, facendu più faciule per ghjunghje à l'apertura di l'ughjettu.
3. LED
Nta l'ultimi anni, un novu contendente hè apparsu in u regnu di e fonti luminose di microscopia fluorescente: LED. I LED offrenu u vantaghju di una commutazione rapida on-off in millisecondi, riducendu i tempi di esposizione di campioni è allargendu a vita di i campioni delicati. Inoltre, a luce LED mostra una decadenza rapida è precisa, diminuendu significativamente a fototossicità durante l'esperimenti di cellule vive à longu andà.
In cunfrontu cù e fonti di luce bianca, i LED emettenu tipicamente in un spettru di eccitazione più strettu. Tuttavia, parechje bande LED sò dispunibuli, chì permettenu applicazioni versatili di fluorescenza multicolore, facendu i LED una scelta sempre più populari in i setup moderni di microscopia di fluorescenza.
4. Laser Light Source
I fonti di luce laser sò altamente monocromatici è direzionali, facenu ideali per a microscopia d'alta risoluzione, cumprese tecniche di super-risoluzione cum'è STED (Stimulated Emission Depletion) è PALM (Photoactivated Localization Microscopy). A luce laser hè tipicamente scelta per currisponde à a lunghezza d'onda di eccitazione specifica necessaria per u fluoroforu di destinazione, chì furnisce alta selettività è precisione in eccitazione di fluorescenza.
L'scelta di una fonte di luce di microscopiu fluorescente dipende da i bisogni sperimentali specifichi è e caratteristiche di mostra. Per piacè sentite liberu di cuntattateci se avete bisognu d'aiutu
Tempu di Postu: Set-13-2023