Un microscopiu di fluoriscenza hè un tipu di microscopiu otticu chì usa una fonte di luce d'alta intensità per illuminà u specimenu è eccite fluorochromes in a mostra. L'illuminazione di u specimenu hè generalmente fatta cù una fonte di luce chì emette luce ultravioletta. Sò largamente usati in i campi biologichi, medichi è industriali.
Cumu funziona un microscopiu di fluorescenza?
Un microscopiu di fluoriscenza usa una lampa di mercuriu o xenon per pruduce luce ultravioletta. A luce entra in u microscopiu è colpi un specchiu dicroicu - un specchiu chì riflette una gamma di lunghezze d'onda è permette à una altra gamma di passà. U specchiu dicroicu riflette a luce ultravioletta finu à u specimenu. Certi esemplari fluorescenu naturalmente sottu a luce ultravioletta perchè cuntenenu sustanzi fluorescenti cum'è a clorofilla. Se l'esemplari per esse vistu ùn hè micca fluorescente naturali, pò esse macchiatu cù coloranti fluorescenti chjamati fluorocromi.
In cosa consiste un microscopio a fluorescenza?
1. Light Source
I fonti di luce più cumuni sò u mercuriu, u xenon è i LED. Mercury furnisce a megliu qualità di luce per u microscopiu di fluorescenza. I LED sò diventati più populari perchè sò menu caru cà l'altri fonti è cunsumanu menu putenza.
| Lampada di Mercuriu | Lampada Xenon | LED | |
| Longueur d'onde de la lumière émise | 350-370 nm | 400 nm ~ 450 nm | 400-700 nm |
| Vita (ora) | 200-300 | 400-600 | 10000 |
| Vantage | 1. High Intensity Light, i surghjenti luminosi più cumuni. 2. Emette forti ultraviolet è blu-violet per excite tutti i tipi di fluorofori. 3. Images brillanti è culurite. | 1. L'intensità spettrale hè stabile. 2. Forte intensità spettrale in infrared è mid-infrared. | 1. Facile à rimpiazzà. 2. Ùn ci hè bisognu di scaldà. 3. Pò esse attivatu è disattivatu istantaneamente. 4. Cuntrolla l'intensità di a fonte di luce. |
| Svantaghju | 1. Una vita corta. 2. Long warm up time. | 1. Special box power DC di bassa tensione hè necessariu per u calore eccessivo. 2. More Caru cà Mercury Lamp | 1. U lume UV hè più debule cà lampa di mercuriu. 2.Ogni lunghezza d'onda di a luce precisa un LED separatu per via di l'ampiezza di banda stretta chì emettenu. |
Mercury Fluorescent Attachment
Attaccu LED fluorescente
2. Filtru di eccitazione
U filtru di eccitazione hè essenziale per u funziunamentu di un microscopiu di fluorescenza. Passa a luce di una lunghezza d'onda più corta, chì u colorante fluorescente puderia assorbe. Inoltre, blocca l'altri fonti di luce eccitante.
Filtru di eccitazione (B,G,U,V)
3. Specchiu Dicroicu
U specchiu dicroicu hè un tipu di filtru otticu chì riflette a luce à certe lunghezze d'onda mentre trasmette altri. Hè adupratu in i microscopi di fluoriscenza per separà e lunghezze d'onda di eccitazione è emissioni.
4. Filtru di emissioni
U filtru di emissione passa solu e lunghezze d'onda emesse da u fluoroforu è blucca tutta a luce indesiderata fora di sta banda - in particulare e lunghezze d'onda di eccitazione.
5. Tinturi fluorescenti
I tinti fluoriscenti sò composti organici chì pussedenu una pruprietà di fluoriscenza, da quale ponu furmà una maghjina fluorescente emettendu luce verde visibile assai cuntrastu dopu esse eccitati da a luce ultravioletta altamente illuminante. Tinturi fluorescenti cumunimenti usati sò; DAPI (49,6-diamidino-2-phenylindole), acridine orange, auramine-rhodamine, Alexa Fluors, o DyLight 488.
Quanti tipi di microscopi di fluoriscenza?
1. Microscope à epifluorescenza verticale:
Hè u tipu più cumuni di microscopiu fluoriscente. L'excitazione di u fluoroforu è a rilevazione di a fluoriscenza sò fatti per u listessu percorsu di luce (vale à dì à traversu l'ughjettu). A maiò parte di i microscopi di fluorescenza, in particulare quelli chì sò usati in e scienze di a vita, sò di u disignu di l'epifluorescenza.
BS-2081F Microscopiu Biologicu Fluorescente di Ricerca
2. Microscope Confocal Fluorescence:
Microscopu di Fluorescenza Confocal: Stu tipu di microscopiu di fluoriscenza combina scanning laser cù illuminazione fluorescente per pruduce una maghjina. Pò esse usatu in una larga gamma d'applicazioni, cum'è studià cellule è tessuti, deteczione di proteine è altre sustanzie in cellule, è misurazione di u grossu di i materiali.
BS-2081F Microscopiu Biologicu Fluorescente di Ricerca
3. Microscope Fluorescence Invertitu
Stu tipu di fonte di luce di microscopiu è u condensatore sò situati nantu à a cima, affruntendu versu u sottu. L'angolo di illuminazione deve esse à 90 gradi in quantu à a superficia di u specimenu esaminatu.
Microscope fluorescent inversé BS-2095F
Chì sò i vantaghji è i svantaghji di i microscopi di fluoriscenza?
Vantaggi:
- Permette l'osservazione di e cellule in l'organismi viventi senza dannà
- Fornisce immagini d'alta risoluzione cù culori precisi
- Permette di studià i prucessi vivi in e cellule
- Esse aduprate per identificà diversi tipi di molécule in e cellule, cum'è proteine o acidi nucleici.
Svantaghji:
-Permette solu l'osservazione di strutture specifiche in una cellula marcata cù u colorante fluorescente.
-U photobleaching per via di l'eccitazione di l'elettroni durante u prucessu di fluoriscenza pò influenzà e molécule reattive di i tinti fluorescenti. In u risultatu, i tinti reattivi puderanu perde a so proprietà chimica di l'intensità di emissione di fluorescenza.
-E cellule sò suscettibili à l'effettu fototossicu dopu a tintura cù coloranti fluorescenti, cum'è e molécule di fluorofore assorbanu i fotoni d'alta energia da a luce di lunghezza d'onda corta.
Chì sò l'applicazioni di un microscopiu di fluorescenza?
I microscopi di fluorescenza sò largamente usati in diversi campi di ricerca è applicazione cumpresi a biochimica, a biologia cellulare, a microbiologia, l'immunologia è a medicina.
1. In u campu di a biologia, u microscopiu di fluorescenza permette l'identificazione precisa è dettagliata di cumpunenti è attività cellulari cellulari è submicroscopici cù l'aiutu di l'etichettatura di tintura fluorescente.
2. In u campu medico, u microscopiu di fluoriscenza pò usà reagenti fluoriscenti per detectà a presenza è a distribuzione di battìri è virus, o per aiutà à l'etichettatura di mira chirurgica per facilità a cirurgia.
3. In u campu di a mineralogia, u microscopiu di fluoriscenza hè spessu usatu per studià sustanzi cù pruprietà di fluoriscenza spontanea, cum'è l'asfaltu, u petroliu, u carbone, l'ossidu di graphene è altri minerali.
4. In a scienza di i materiali, u microscopiu di fluoriscenza pò esse usatu in l'industria tessili o l'industria di carta per analizà i materiali basati in fibra.
Tempu di Postu: 14-Mar-2023